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Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀工作原理是怎樣的

更新時間:2022-05-30      點擊次數(shù):4166
  Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀工作原理:
  采用雙抗夾心聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)實現(xiàn)極低含量的蛋白定量檢測。先將捕獲抗體偶聯(lián)到磁珠上,磁珠直徑2.7μm,結(jié)合了抗體的磁珠和目的蛋白結(jié)合,而不與目的分子結(jié)合的磁珠保持無標(biāo)記物。洗滌磁珠去除非特異性結(jié)合的蛋白,加入酶反應(yīng)底物,磁珠轉(zhuǎn)移到Simoa光盤上,每個光盤有24個芯片,而單個芯片表面有216000個小孔,每個小孔的直徑是4.2μm,落入一個磁珠,去除多余的磁珠并將熒光信號密封在小孔中。由于反應(yīng)體系極小,比傳統(tǒng)100μl的體系小了20億倍,此時即使一個的目的蛋白分子催化底物可以產(chǎn)生足夠的熒光分子被CCD成像系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)字化解讀。
  Simoa數(shù)字式單分子免疫陣列分析儀常見故障出現(xiàn)原因和解決措施:
  1.真空壓力不足:進(jìn)行真空壓力測試,若測試結(jié)果正常,可知是因真空傳感器檢測不到真空壓力引起。該機(jī)的壓力測試由兩個傳感器分別檢測高、低壓力,對有問題的傳感器進(jìn)行調(diào)整或清洗后,再次測試真空壓力,壓力正常后調(diào)節(jié)傳感器螺絲使高、低壓力指示在規(guī)定范圍內(nèi)。
  2.壓力表指示為零:進(jìn)行真空壓力測試,能聽到泵的工作聲音,但壓力表指示為零。首先檢查廢液瓶所接的真空管,測試真空壓力,判斷該故障是否因漏氣或壓力表損壞引起。檢查各管道的接口有無漏氣,檢查相關(guān)的四只電磁閥(在真空壓力測試時,這四只電磁閥不工作,為關(guān)閉狀態(tài)),對有問題的管道或電磁閥及時修復(fù)或者更換。
  3.發(fā)光體錯誤:檢查發(fā)光體表面發(fā)現(xiàn)有液體滲出,該故障分三步檢查:檢查廢液探針、相關(guān)管路及清洗池是否有堵塞、漏液;檢查加樣電磁閥、排液電磁閥,電磁閥,有污物會引起進(jìn)水或排水不暢;檢查與廢液探針管路相連接的堿泵清洗管路是否有漏氣以及堿泵是否有裂縫。
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